Primary Human Herpesvirus 6 Infection in Young Children ad 6

Dla porównania, próbki komórek jednojądrzastych krwi obwodowej uzyskane podczas pierwszej wizyty u dzieci z ujemnym mianem HHV-6 miały niższą wartość dodatnią HHV-6 w reakcji PCR (25 procent). W celu określenia wskaźnika dodatniego wyniku tej metody w jednojądrzastych komórkach krwi obwodowej dzieci wcześniej zainfekowanych, wyniki PCR analizowano u tych, którzy nie mieli wiremii HHV-6, ale których próbki surowicy uzyskane podczas ostrej choroby były dodatnie pod względem przeciwciał i którzy byli w wieku czterech miesięcy lub starszych (granica wybrana w celu wyeliminowania tych z matczynym przeciwciałem HHV-6). W tej grupie dzieci podejrzewanych o wcześniejszą infekcję, HHV-6 wykryto metodą PCR w komórkach jednojądrzastych krwi obwodowej 41 procent. Jednojądrzaste komórki 75 dzieci, które były ujemne pod względem hodowli i testów przeciwciał w czasie pierwszej wizyty, były również testowane za pomocą PCR. Wszystkie były negatywne, z wyjątkiem jednego dziecka ocenianego pod kątem gorączki i możliwej sepsy, która miała 21 miesięcy. Profile z ograniczeniami endonukleazy
Figura 2. Figura 2. Profile ograniczające bamHI-endonukleazy izolatów HHV-6. Po trawieniu i rozdzieleniu za pomocą elektroforezy DNA dwukierunkowo przenikano na błonę nitrocelulozową i hybrydyzowano z sondą swoistą dla całego genomu wirusowego (panel A) lub strukturą powtarzalnego powtarzania (panel B). Numery linii są numerycznymi identyfikatorami tak otrzymanych izolatów, a ścieżki K i Z zawierają DNA odpowiednio z japońskiego izolatu roseoli17 i HHV-6 (szczep Z29). Litery po prawej oznaczają pokazywane pasma. Stałe trójkąty wskazują małe fragmenty znalezione we wszystkich naszych izolatach i w izolatach japońskich, które badano poprzednio, 17, które pochodzą z części końcowego powtórzenia rozciągniętego przez pasmo BamHI L w HHV-6. Panel A pokazuje złożenie krótkich (górnych) i długich (dolnych) ekspozycji autoradiograficznych tego samego blotu, ze splotem wskazanym przez otwarty trójkąt po lewej stronie, w celu optymalizacji rozdzielczości i widoczności pasm. Het, oznacza fragment BamHI obejmujący heterogenny region.
Aby potwierdzić, że wirusowe izolaty uzyskane od dzieci były niezależnymi izolatami i aby ocenić ich stopień pokrewieństwa, porównano wzorce migracji fragmentów generowanych przez trawienie wirusowego DNA endonukleazami restrykcyjnymi. W trawieniu BamHI, na przykład (ryc. 2), ogólne podobieństwo między izolatami było wyraźnie widoczne, przy czym zmienność była największa w końcowych fragmentach, z pewnymi zmianami widocznymi gdzie indziej. Na podstawie porównań wzorców uzyskanych podczas trawienia 20 izolatów z czterema różnymi enzymami (BamHI, ClaI, HindIII i KpnI), każdy izolat miał unikalny profil. Jak opisali Pellett i wsp. 18, zmienność migracji fragmentów obejmujących region genomu HHV-6 zarówno pomiędzy szczepami, jak i wewnątrz jednego szczepu może prowadzić do błędnych wniosków dotyczących tożsamości szczepu. Jeżeli te fragmenty są wykluczone z analizy, 20 izolatów oddziela się na 14 grup, z maksymalnie trzema członkami w grupie.
Dyskusja
Badanie to sugeruje, że HHV-6 jest ważną przyczyną ostrej choroby u małych dzieci w Stanach Zjednoczonych
[przypisy: parafia wiry, parafia babiak, vitapil ulotka ]